Mahsulotlar

Tris asetat tuzi tez-tez ishlaydigan bufer sifatida va agaroz jellarida ishlatiladigan TAE (Tris-asetat-EDTA) buferini tayyorlashda ishlatiladi.Tris Acetate-EDTA buferi DNK agaroz gel elektroforezi uchun ishlatiladi, lekin u ham denaturatsiyalanmaydigan RNK agaroz gel elektroforezi uchun ishlatiladi.Ikki zanjirli DNK TAEda boshqa buferlarga qaraganda tezroq ishlaydi va kengaytirilgan elektroforez paytida charchashi mumkin.Kengaytirilgan elektroforez paytida bufer aylanishi yoki buferni almashtirish pastroq buferlash qobiliyatini bartaraf etishi mumkin.Eritmada DNKning harakatchanligini o'rganish uchun turli konsentratsiyalarda foydalanish mumkin.TBE buferidagi borat (Tris-Borate-EDTA Bufer, 10X Powder Pack, sc-296651) ko'plab fermentlar uchun kuchli inhibitor bo'lganligi sababli, DNK namunasi uchun fermentativ ilovalarni ko'rib chiqishda TAE buferi tavsiya etiladi.Tris asetat tuzi, shuningdek, olovli lusiferaza bilan ATP tahlillarida yuqori sezuvchanlikka ega bo'lgan buferdir.

Foydalanish: TAE ishlaydigan bufer DNK agaroz gel elektroforezi uchun eng ko'p ishlatiladigan bufer bo'lib, mahalliy RNK agaroz gel elektroforezi uchun ham qo'llaniladi.Ikki zanjirli DNK TAEda boshqa buferlarga qaraganda tezroq harakat qiladi, lekin uzaygan elektroforez vaqtida bufer ionlarining kamayishi tufayli ham suzmaydi.Uzoq muddatli elektroforez paytida bufer aylanishi yoki bufer almashinuvi pastki bufer sig'imini qoplashi mumkin.2 40 mM Tris asetat va 1 mM EDTA, pH 8,3 o'z ichiga olgan 1 mMTAE buferini olish uchun konsentrlangan TAE buferini suyultiring.1 mMTAE buferi ham agaroz jellarida, ham ishlaydigan bufer sifatida ishlatilishi mumkin.Maksimal ruxsat olish uchun qo'llaniladigan kuchlanish 5V / sm dan past bo'lishi tavsiya etiladi (birlik elektrodlari orasidagi masofa).

Ilova: TAE ishlaydigan bufer Chemicalbook gelidagi DNK agaroz gel elektroforezi uchun eng ko'p ishlatiladigan bufer bo'lib, u denaturatsiyalanmaydigan RNK agaroz gel elektroforezi uchun ham qo'llaniladi.Ikki zanjirli DNK TAEda boshqa buferlarga qaraganda tezroq harakat qiladi, lekin uzaygan elektroforez vaqtida bufer ionlarining kamayishi tufayli ham suzmaydi.Uzoq muddatli elektroforez paytida bufer aylanishi yoki bufer almashinuvi pastki bufer sig'imini qoplashi mumkin.Konsentrlangan TAE buferi 40 mM Tris asetat va 1 mM EDTA, pH 8,3 ni o'z ichiga olgan 1 mMTAE buferini olish uchun suyultirildi.1 mMTAE buferi ham agaroz jellarida, ham ishlaydigan bufer sifatida ishlatilishi mumkin.Maksimal ruxsat olish uchun qo'llaniladigan kuchlanish 5V / sm dan past bo'lishi tavsiya etiladi (birlik elektrodlari orasidagi masofa).

Foydalanish: yong'in lyusiferaza bilan ATPni aniqlashda bu mahsulot eng sezgir tampon hisoblanadi;glutamat bog'lanishini aniqlash.

[3H]l-glutamik kislotaning retseptorlari bo'lmagan materiallarga almashtiriladigan bog'lanishi.

[3H]L-glutamik kislotaning mikrofuge naychalari va shisha bilan bog'lanishi to'rtta tamponda tekshirildi.Ushbu materiallarga fon bog'lanishi ahamiyatsiz edi, lekin Tris-HCl va Tris-sitrat buferida santrifüj yoki assimilyatsiya qilish orqali oshirildi.Bu bog'lanish ancha kamroq edi yoki HEPES-KOH yoki Tris-asetat buferi o'rniga ishlatilganda.[3H]L-glutamatning mikrofuga naychalari bilan bog'lanishi L- lekin glutamat va aspartatning D-izomerlari tomonidan inhibe qilingan.DL-2-amino-7-fosfonoheptanik kislota ham bog'lanishni inhibe qilmadi.Past va o'rtacha darajadagi inhibisyonni ko'rsatadigan boshqa birikmalar: N-metil-D-aspartat, kvisqualat, L-glutamik kislota dietil esteri, N-metil-L-aspartat, kainat va 2-amino-4-fosfonobutirat.Bog'lanish denatüratsiyalangan kalamush miya membranalari tomonidan inhibe qilingan.Proteinga bog'liq [3H] glutamat ulanishi Tris-asetat tamponida bog'langanda qayta-qayta muzlatilgan eritilgan membrana preparati bilan olindi.Tris-asetat yoki HEPES-KOH buferini glutamat bilan bog'lash tahlilida qo'llash tavsiya etiladi.Agar Tris-HCl yoki Tris-sitrat buferi ishlatilsa, mikrofuga naychalari yoki shisha tolali filtrlarga ulanishni tuzatish uchun tegishli nazorat tajribasini o'tkazish kerak.