Mahsulotlar

Kaposi sarkomasi bilan bog'liq bo'lgan gerpesvirusning (KSHV) ORF45 oqsili gammaherpesvirusga xos darhol-erta tegument oqsilidir.Bizning oldingi tadqiqotlarimiz KSHV infektsiyasining erta va kech bosqichlarida uning hal qiluvchi rolini ochib berdi.Ushbu tadqiqotda biz monoklonal antikorlar paneli yordamida ORF45 interaktomini tekshirdik.Oldin aniqlangan hujayradan tashqari tartibga solinadigan kinaz (ERK) va p90 ribosomali S6 kinaz (RSK) oqsillariga qo'shimcha ravishda, biz yana bir nechta tozalangan oqsillarni, shu jumladan ~ 38 kDa va ~ 130 kDa ning taniqlilarini topdik.Mass-spektrometriya shuni ko'rsatdiki, 38 kDa oqsil virusli ORF33 va 130 kDa protein hujayrali USP7 (ubikitinga xos proteaza 7).Biz ORF33-bog'lash domenini ORF45 ning yuqori darajada saqlangan karboksil-terminal 19 aminokislotalar (aa) bilan va USP7-bog'lash domenini ORF45 markaziy mintaqasida xabar qilingan konsensus motiviga xaritalashtirdik.Immunofloresan bo'yashdan foydalanib, biz ORF45 ning ORF33 yoki USP7 bilan kolokalizatsiyasini ham transfektsion holat ionlari ostida ham, KSHV bilan kasallangan hujayralarda ham kuzatdik.Bundan tashqari, biz ORF33/USP7 qismini yadrodan sitoplazmaga ORF45 ga bog'liq holda qayta joylashishini payqadik.Biz ORF45 ORF33 oqsil to'planishining ko'payishiga olib kelishini aniqladik, agar ORF45-dagi ORF33 yoki USP7-bog'lovchi domen o'chirilgan bo'lsa, bekor qilindi.Bundan tashqari, KSHV genomidagi ORF45 ning saqlanib qolgan karboksil terminalini yo'q qilish KSHV bilan kasallangan hujayralardagi ORF33 oqsili darajasini keskin pasaytirdi va nasl virionlarini ishlab chiqarishni bekor qildi.Birgalikda bizning natijalarimiz nafaqat ORF45 interaktomining yangi tarkibiy qismlarini ochibgina qolmay, balki bu oqsillar orasidagi o'zaro ta'sir KSHV litik replikatsiyasi uchun hal qiluvchi ahamiyatga ega ekanligini ko'rsatadi. Kaposining sarkomasi bilan bog'liq gerpes virusi (KSHV) bir nechta odam saratonining qo'zg'atuvchisi hisoblanadi.KSHV ORF45 - bu KSHV litik replikatsiyasi uchun zarur bo'lgan ko'p funktsiyali oqsil, ammo ORF45 o'zining muhim funktsiyalarini bajaradigan aniq mexanizmlar noaniq.Bizning oldingi tadqiqotlarimiz shuni ko'rsatdiki, hujayralardagi barcha ORF45 proteinlari yuqori molekulyar og'irlikdagi komplekslarda mavjud.Shuning uchun biz litik replikatsiya paytida uning rollari haqida tushuncha berish uchun ORF45 interaktomini tavsiflashga harakat qildik.Monoklonal antikorlar panelidan foydalanib, biz KSHV bilan kasallangan hujayralardagi ORF45 interaktomini tekshirdik.Biz ORF45 ning ikkita yangi bog'lovchi sheriklarini aniqladik: virusli oqsil ORF33 va hujayrali ubiquitinga xos proteaza 7 (USP7).Bundan tashqari, biz ORF45 va ORF33 o'rtasidagi o'zaro ta'sir KSHV virusli zarralarini samarali ishlab chiqarish uchun juda muhim ekanligini ko'rsatamiz, bu o'zaro ta'sirning maqsadli aralashuvi KSHV litik replikatsiyasini inhibe qilish uchun yangi strategiya bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.