Mahsulotlar

Kolitsin E1 kanal domenining membrana topologiyasi floresan rezonans energiyasini uzatish (FRET) orqali o'rganildi.FRET donor sifatida genetik kodlangan lyuminestsent aminokislota (kumarin) va FRET qabul qiluvchisi sifatida DABMI (4-(dimetilamino)fenilazofenil-4'-maleimid) bilan bog'langan tanlab belgilangan sistein qoldig'ini o'z ichiga oldi.Floresan kumarin qoldig'i ortogonal tRNK/aminoatsil-tRNK sintetaza juftligi orqali oqsilga qo'shildi, bu kolitsin kanali domenidagi har qanday saytga tanlab qo'shilishga imkon berdi.Har bir variant kumarinni kiritish uchun to'xtash (TAG) mutatsiyasiga va DABMI biriktirilishi uchun sistein (TGT) mutatsiyasiga ega edi.1-6 spiral ichidagi oltita interhelikal masofa ham eruvchan, ham membrana bilan bog'langan holatlar uchun FRET tahlili yordamida aniqlandi.FRET ma'lumotlari membrana assotsiatsiyasidan so'ng 3-6 spirallar orasidagi spirallararo masofalarda katta o'zgarishlarni ko'rsatdi, bu kanal domenining membrana bilan bog'langan tuzilishi haqida yangi ma'lumot beradi.Umuman olganda, kumarin-DABMI FRET spirallararo samaradorliklari kolitsin kanali uchun soyabon modeliga asoslanib, membranani bog'lashda kamaydi.Hozirgi va avval chop etilgan FRET ma'lumotlari asosida kanal domenining yopiq holatining taxminiy modeli ishlab chiqilgan.Model 1-7 spirallarning hujayradan tashqari tomondan soat yo'nalishi bo'yicha dumaloq joylashishini va 1, 6, 7 va 10 spirallarning membranalararo assotsiatsiyasini 8 va 9 spirallardan hosil bo'lgan markaziy transmembran soch turmagi atrofida taklif qiladi.