Mahsulotlar

Proteinning fosforillanishi turli xil hujayra funktsiyalarini tartibga soladi va o'simliklarning erta rivojlanishida asosiy rol o'ynaydi.Arabidopsis ko'chatlarida protein fosforlanishining oldingi tadqiqotlarini to'ldirish va kengaytirish uchun biz denaturatsiya qilinmagan sharoitda protein ekstraktsiyasini immobilizatsiyalangan metall-ionga yaqinlik xromatografiyasi (IMAC) bilan Rubisko-tushgan ekstraktlarda buzilmagan fosfoproteinlarni boyitish bilan birlashtirgan muqobil yondashuvdan foydalandik. ikki o'lchovli gel elektroforezi (2-DE) va suyuq xromatografiya-tandem massa spektrometriyasi (LC-MS/MS) yordamida.Jel ichidagi tripsin hazm qilish va tanlangan jel dog'larini tahlil qilish 144 ta fosforlangan peptid va qoldiqlarni aniqladi, ulardan faqat 18 ta fosfopeptid va 8 ta fosfozit PhosPhAt 4.0 va P3DB Arabidopsis thaliana fosforlanish saytlarida topilgan.Aniqlangan 82 fosfoproteinning yarmidan ko'pi uglevod almashinuvida, fotosintezda / nafas olishda yoki oksidlovchi stressga javob berishda ishtirok etgan.2-DE va ​​LC-MS / MS dan oldin buzilmagan fosfoproteinlarni boyitish peptid darajasida boyitishdan foydalanadigan usullar bilan solishtirganda fosforlangan treonin va tirozin qoldiqlarini aniqlashni kuchaytiradi, bu ikkala yondashuv fosforlanish joyini qoplash nuqtai nazaridan biroz to'ldiruvchi ekanligini ko'rsatadi.Yosh ko'chatlar natijalarini ilgari etuk Arabidopsis barglari uchun olingan natijalar bilan taqqoslash ushbu to'qimalarda differensial fosforlangan beshta oqsilni aniqladi, bu o'simlik rivojlanishi davrida protein fosforlanishining dinamikasini o'rganish uchun ushbu texnikaning imkoniyatlarini ko'rsatadi.