Mahsulotlar

LecA (PA-IL) Pseudomonas aeruginosa tomonidan ishlab chiqarilgan sitotoksik lektin va adezin bo'lib, u yuqori o'ziga xoslik va yaqinlik bilan hidrofobik galaktozidlarni bog'laydi.LecA-egfp tarjima sintezi va biofilm hujayradan tashqari matritsaning immunoblot tahlilidan foydalanib, biz lecA biofilm o'sgan hujayralarda ifodalanganligini ko'rsatamiz.Polistirol va zanglamaydigan po'latdan yasalgan statik biofilm tahlillarida biofilm chuqurligi va sirt qoplami lecA mutatsiyasi bilan kamaydi va LecA-ni haddan tashqari ishlab chiqaruvchi PAO-P47 shtammida kuchaytirildi.Asosiy shtammi, PAO-P47 bilan bioplyonka yuzasi qoplanishi, lekin po'lat kuponlardagi lecA mutant emas, shuningdek, izopropil-beta-D-tiogalaktozid (IPTG) yoki p-nitrofenil-alfa-D-galaktozid (IPTG) ishtirokida o'sish bilan inhibe qilingan. NPG).Bundan tashqari, ushbu hidrofobik galaktozidlar yo'qligida hosil bo'lgan etuk yovvoyi turdagi biofilmlar IPTG qo'shilishi bilan tarqalishi mumkin.Bundan farqli o'laroq, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lekti n uchun yuqori yaqinlikka ega bo'lgan p-nitrofenil-alfa-L-fukoza (NPF) qo'shilishi biofilm shakllanishiga yoki tarqalishiga hech qanday ta'sir ko'rsatmadi.P. aeruginosa PAO1 ning planktonik o'sishiga IPTG, NPG yoki NPF mavjudligi ta'sir ko'rsatmadi va shtamm bu shakarlarni uglerod manbalari sifatida ishlata olmadi, bu biofilm shakllanishiga kuzatilgan ta'sir LecA-ligandning raqobatbardosh inhibisyoniga bog'liqligini ko'rsatadi. bog'lash.Xuddi shunday natijalar po'lat kuponlarda dinamik oqim sharoitida o'stirilgan biofilmlar uchun ham olingan bo'lib, LecA turli xil muhit sharoitlarida P. aeruginosa biofilm arxitekturasiga hissa qo'shishini ko'rsatadi.

Arabidopsis o'simliklarining barglarida ksiloglyukan oligosakkaridlarining yon zanjiridan t-fukosil qoldig'ini chiqarishga qodir alfa-L-fukosidaza (EC 3.2.1.51) aniqlangan.Bundan tashqari, shunga o'xshash substrat o'ziga xosligi bo'lgan alfa-L-fukosidaza SDS-PAGEda bitta tarmoqli hosil qilish uchun karam (Brassica oleracea) barglaridan tozalandi.Ushbu oqsil guruhidan ikkita peptid ketma-ketligi olingan va ular AtFXG1 deb nomlashni taklif qilgan alfa-fukosidazani kodlovchi Arabidopsis genini aniqlash uchun ishlatilgan.Bundan tashqari, ma'lum alfa-L-fukosidazalar bilan homologiyaga ega Arabidopsis geni ham topildi va biz uni AtFUC1 deb nomlashni taklif qildik.AtFXG1 va ATFUC1 ikkalasi ham Pichia pastoris hujayralarida va madaniy muhitga ajratilgan alfa-L-fukosidaza faolligida heterologik tarzda ifodalangan.AtFXG1 tomonidan kodlangan alfa-L-fukosidaza ksiloglukan XXFG oligosakkaridlariga, shuningdek, 2'-fukosil-laktitolga qarshi faol edi, lekin p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranozidga qarshi emas.Biroq, geterologik tarzda ifodalangan AtFUC1 faqat 2'-fukozil-laktitolga nisbatan faol edi.Shunday qilib, birinchisi ksiloglukan metabolizmi bilan bog'liq bo'lishi kerak.